即时热搜 DNA提取实验必备的材料有哪些（详细介绍DNA实验所需用品）

一、dna提取过程中各种试剂的作用

刑侦剧中的，有时会从血液或毛发样本中提取嫌疑犯的DNA，从而得出破获悬案的关键证据,更终确认出罪犯。他们给观众留下了深刻的印象：提取DNA需要各种高大严密的实验设备。

事实上，借助简单的厨房工具，我们在家里就可以轻松做提取粗制DNA的小实验哦。

1准备材料。

这里我们需要的有：新鲜的菠萝（可用西柚酸橙等水果替代）、草莓、医用酒精、食盐、洗洁精、漏网、搅拌工具和筷子。

2将1~3颗的草莓去蒂（其他水果也可），加入100毫升水和一勺食盐，将草莓仔细碾碎、搅拌至没有明显的果肉颗粒（这里可以借助搅拌工具哦）。

原理

各种水果都是可以提取DNA的，本实验选择草莓主要是由于其“八倍体”的特性——每个草莓细胞中都有8份基因组，DNA含量高。另外，草莓更易碾碎、不必削皮去籽的特性也让实验更加简化。

食盐中的钠离子和氯离子可中和DNA上的电荷，让DNA变形聚集，使其在后续过程的提取中，更易沉淀出来。

3静置草莓果汁溶液片刻。

（悄咪咪喝一口）

4在所得悬液中加入5~10毫升洗洁精，加入几滴新榨菠萝汁，轻轻搅匀后静置10分钟，随后用滤网或者滤纸将悬液中的大颗粒滤除。

原理

细胞膜和细胞核膜的主要成分是脂质 ，洗洁精中的表面活性剂可破坏这一结构，将其中的DNA释放至溶液中。菠萝汁中的菠萝蛋白酶，可进一步将和DNA紧密结合的蛋白质消化掉，使我们得到更加纯粹的DNA。

西柚酸橙中也有与菠萝中相似的蛋白酶，因此也可以替换菠萝。

5将在冰箱冷藏过的医用酒精，沿着容器侧面缓缓倒入，此时可见酒精和草莓汁的明显分现象。

原理

DNA是极性分子，乙醇是非极性分子。根据“相似相溶”的原理，DNA可溶解于水但难溶于乙醇，因此会在高浓度酒精中相互吸附形成沉淀。

冷却酒精是为了进一步降低DNA的溶解度，获得更多沉淀。

6静置一段时间后，我们就可以清楚的看到，在两种液体的交界处，白色的絮状DNA沉淀大量生成，并在浮力的作用下上升至酒精上。

粘稠物（或类似絮状物）成团，即可用筷子将这些粗提的DNA取出。

二、dna提取中常用试剂的作用

提取

DNA

需要的仪器和试剂：

⑴

1.5ml

离心管

⑵

移液管

: 1000μl, 200μl, 40μl

各一支和移液管尖头

: 100-

1000μl, 1

-

200μl

各一盒

⑶

微型滤柱（备用）

⑷

小型旋转混合器一台

⑸

小型离心机

可放入

1.5ml

离心管和

2ml

收集管

⑹

恒温水浴

⑺

电冰箱

: -20

℃

, 4

℃

⑻

无水乙醇

自备

⑼

70%

乙醇

自备

⑽

DNA

提取试剂盒。

内含

⑴

裂解液

⑵

裂解液

2

⑶消化液

⑷纯化液

⑸弥散液

⑹蛋

白酶

K

⑺

带钩细玻棒一盒

⑻

微型滤柱若干。

一．从

1ml

全血或体液中提取

DNA

的步骤：

⑴

裂解

：

取

1ml

全血，血桨，血清，淋巴细胞放入到

1.5ml

的离心管中，加入

μl

裂

解液

上下翻转，

使沉淀物分散，

旋转脉动

15

秒后放入离心机中离心，

离心速率为

8000rpm

，

1min。

。倒掉上液，可见离心管底部有血色沉淀。重复此裂解步骤一次，这次是加入

1ml

裂解液

更后用移液管吸净所有上液弃去

以使离心管底部的血色沉淀不再残留有裂解

液

⑵

裂解

2:

在上面离心管中加入

1ml

裂解液

2

。上下翻转，务必使沉淀物分散，

旋转脉动

15

秒后放入离心机中离心，

8000rpm

，

1 min。

倒掉上清液，可见离心管底部有微量淡红色

沉淀。重复此裂解步骤一次，这次仍然是加入

1ml

裂解液

2

，更后用移液管吸净所有上清液

弃去，以使离心管底部的灰白色沉淀不再残留有裂解液

2

⑶

消化：

吸取蛋白酶

K 10μl ( = 0.2mg )

加入到上面的离心管中，用移液管尖头反复吹打，

使蛋白酶

K

与沉淀物均匀接触后，

加入

320μl

消化液，

上下翻转离心管，

务必使沉淀物分

散于消化液中。放入

58

℃水浴中消化

15

分钟。更后可见澄明的消化液体。

⑷

纯化：在上面的消化液体中加入

110μl

纯化液，

上下翻转离心管几下后，

离心，速率

为

15000rpm, 1min

，

把上清液吸出放入到装有

1000μl

无水乙醇的

1.5ml

离心管中，轻轻上

下翻转

10

次，

可见絮状

DNA

析出。

用带钩的玻璃棒挑起絮状

DNA

放入到

100μl 70%

乙醇

中耒回漂洗

20

次，钩出

DNA

，在空气中凉干一下后放入到

100μl

弥散液中。把

DNA

弥散

液保存于

4

℃，过夜，

使之充分弥散后使用。提取完毕。

如要立即用此

DNA

做

PCR

实验，把

DNA

弥散液放在

58

℃水浴中，保温

30

分钟

用手指

拍打离心管子，使

DNA

弥散后使用。提取完毕

⑸

收集：

在

DNA

极少量，

不能用带钩玻璃棒挑起的情况下

把有絮状

DNA

的溶液倒入

微型柱过滤器

包括滤柱和收集管

中，

滤器放入离心机内，离心

: 8000rpm , 1 min。。 DNA

便

附着在滤漠上，弃去滤液，把滤柱放回收集管上。

⑹

吸取

200μl

70%

乙醇于滤柱内，离心

8000rpm

，

1min

，

弃去滤液。把滤柱放回收集管

上，再心

15000rpm

，

1 min。

使吸附在滤膜上的

DNA

不再附有乙醇。

⑺

回收

DNA:

把上面附着

DNA

的滤柱放入一个干净的

1.5ml

离心管中。

吸取

100μl

已温

热到

58

℃的弥散液，轻轻放入滤膜的表面，

保温

58

℃静置

10

分钟。

离心

8000rpm

，

1 min。

，

DNA

弥散液便滤入到干净的

1.5ml

离心管内。

此

DNA

弥散液可即时作

PCR

实验用。

提取完毕。

附：

如从

2ml

全血中提出取

DNA

，

方法和步骤与从

1ml

全血一样，

只是在步骤⑷

纯化之前，

把两个

1ml

全血的消化液管内容物合并后，

加入

220μl

纯化液，

上下翻转离心管几下后，

离

三、dna提取用什么试剂

DNA

的提取与分析实验报告

实验目的：

本实验旨在通过实践掌握

DNA

的提取和分析方法，了解

DNA

的结

构及其在科学研究中的应用。

实验材料和设备：

1、 DNA

样本：水果、植物组织等，如番茄、苹果、香蕉等；

提取缓冲液：

NaCl

溶液、

EDTA

溶液、洗涤缓冲液等；

蛋白酶

K

：用于降解蛋白质；

4、

各种酒精溶液：乙醇、异丙醇等；

5、

细胞破碎装置：如搅拌器、均质器等；

6、

定量分光光度计：用于测定提取的

DNA

浓度。

实验步骤：

样本破碎：取适量样本

如番茄

，用细胞破碎装置将其破碎（如

搅拌器），使细胞壁破裂释放

DNA

细胞裂解：将破碎的样本转移到容器中，加入适量的提取缓冲液，

混合均匀，使

DNA

从细胞核中被释放出来。

蛋白质降解：加入适量的蛋白酶

K

，使其与蛋白质结合并发挥作

用，降解蛋白质分子。

四、dna提取实验步骤图示

1、DNA提取过程中各种试剂的作用及原理1、溶液I溶菌液:溶菌酶：它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的P -1,4糖苷键，因而具有 溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度,维持渗透压，防止DNAg机械剪切力作用而降解。EDTA(1)螯合Mg牡、Ca2+等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA勺降解 作用(DNase作用时需要一定的金属离子作 辅基)；(2)EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。2、溶液IINaOH-SDS液:NaOH核酸在pH大于5,小于9的溶液中，是稳定的。 但当pH 12或pHv

2、3时，就会引起双链之间 氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6、 因而促使染色体DNA与质粒DNA勺变性。SDS(1)(2)(3) 而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除 干净，防止在下一步操作中(用RNase去除RNA寸)受到干扰。3、溶液III-3mol/L NaAc(pH)溶液：NaAc的水溶液呈碱性，为了调节pH至、必须加入大量的冰醋酸。所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液，调回pH至中性，使变性的质粒DN

3、A能够复性，并能稳定存在。而高盐的3mol/L NaAc有利于变 性的大分子染色体DNASDS是离子型表面活性剂。它主要功能有： 溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。 解聚细胞中的核蛋白。SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-R+ -蛋白质的复合物，使 蛋白质变性RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷，减少 相斥力而互相聚合，后者是因为钠盐与SDS-蛋白复合物作用后，能形成较小的钠盐形式复合物，使 沉淀更完全。4、为什么用无水乙醇沉淀DNA用无水乙醇沉淀DNA这是实验中更常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以 任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会

4、起任何化学反应，对DNAa安全，因此是理想的沉淀剂。DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水 分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，其乙醇的更终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大，尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵，更后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA一般在温下放置15-3

5、0分钟即可。5、在用乙醇沉淀DNA时，为什么一定要加NaAc或NaCl至更终浓度达0.10.25mol/L?在pH为8左右的溶液中，DNA分子是带负电荷的，加一定浓度的NaAc或NaCI， 使Na冲和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀，当加入的盐溶液浓度太低时，只有部分DNA形成DNA钠盐而聚合，这样就造成DNA沉淀不完全，当加入的盐 溶液浓度太高时，其效果也不好。在沉淀的DNA中，由于过多的盐杂质存在，影响DNA的酶切等 反应，必须要进行洗涤或重沉淀。6、加核糖核酸酶降解核糖核酸后，为什么再要用SDS与KAc来处理？加进去的RNase本

6、身是一种蛋白质，为了纯化DNA又必须去除之，加SDS可使 它们成为SDS蛋白复合物沉淀，再加KAc使这些复合物转变为溶解度更小的钾 盐形式的SDS-蛋白质复合物，使沉淀更加完全。也可用饱和酚、氯仿抽提再沉 淀，去除RNase在溶液中，有人以KAc代替NaAc，也可以收到较好效果。7、为什么在保存或抽提DNA过程中，一般采用TE缓冲液？在基因操作实验中，选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。磷酸盐缓冲系统(PKa=7.2)和硼酸系统(PKa=9.24)等虽 然也都符合细胞内环境的生理范围(pH)，可作DNA的保存液，但在转化实验时， 磷酸根离子的种类及数量将与Ca2

7、+产生Ca3(PO4)2沉淀，在DNA反应时，不同 的酶对辅助因子的种类及数量要求不同，有的要求高离子浓度，有的则要求低 盐浓度，采用Tris-HCl(PKa=8.0)的缓冲系统，由于缓冲液是TrisH+/Tris， 不存在金属离子的干扰作用，故在提取或保存DNAM,大都采用Tris-HCl系统， 而TE缓冲液中的EDTAg能稳定。氯仿的作用主要是使蛋白变性并有助于液相与有机相的分开，异戊醇的作用是 消除抽提过程中出现的泡沫。氯仿是强蛋白质变性剂，抑制RNA酶的活性，除去蛋白质污染。基因组DNA- CTABtCTABt原理（植物DNA提取经典方法）CTAB（hexadecyltrimethyl

8、ammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵）,是一种 阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中（0.7mol/L NaCl）,CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇 沉淀即可使核酸分离出来。注:CTAB溶液在低于15C时会形成沉淀析出，因此在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热，且离心时温度不要低于15C。基因组DNA- CTABtCTABS取缓冲液的经典配方Tris-HCl （pH8.0）提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏;EDTA螯合Mg2+或Mn2离子,抑制DNase

9、活性；NaCl提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中；CTAB溶解细胞膜,并结合核酸,使核酸便于分离；P-巯基乙醇是抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌,避免褐变，使酚容易去除基因组DNA- CTAB法CTAB提取缓冲液的改进配方PVP聚乙烯吡咯烷酮）是酚的络合物,能与多酚形成一种不溶的络合物质,有效 去除多酚，减少DNA中酚的污染；同时它也能和多糖结合，有效去除多糖。基因组DNA的提取核酸分离,纯化采用吸附材料吸附的方式分离DNA寸，应提供相应的缓冲体系采用有机（酚/氯仿）抽提时应充分混匀,但动作要轻柔离心分离 两相时,应保证一定的转速和时间针对不同材料的特点,在提取过程中辅以相应 的去

10、杂质的方法基因组DNA勺提取核酸分离，纯化蛋白质的去除：酚/氯仿抽提使用变性剂变性（SDS,异硫氰酸胍等）高盐洗涤蛋白 酶处理核酸分离,纯化 多糖的去除：高盐法：用乙醇沉淀时,在待沉淀溶液中加入1/2体积的5M NaCl,高盐可溶解多糖。用多糖水解酶将多糖降解。在提取缓冲液中加一定量的氯苯（1/2体积），氯苯可以与多糖的羟基作用，从而去除多糖。用PEG800代替乙醇沉 淀DNA在500卩L DNA液中加入200卩I 20% PEG8000 （含1.2 M NaCl） ,冰浴20min。核酸分离,纯化多酚的去除：在抽提液中加入防止酚类氧化的试剂：P -巯基乙醇，抗坏血酸，半 胱氨酸，二硫苏糖醇等

11、加入易与酚类结合的试剂：如PVP聚乙烯吡咯酮）,PEG（聚 乙二醇） ,它们与酚类有较强的亲和力,可防止酚类与DNA勺结合 盐离子的去除：70%的乙醇洗涤核酸吸附,沉淀和溶解使用合适的吸附材料吸附 核酸，其它的杂质均被洗掉，达到纯化DNA的目的另一种方式加入1/10体积的NaAc（pH5.2,3M）,用预冷的乙醇或异丙醇沉淀RNA吸附或沉淀后应用70%勺乙醇 洗涤,以除去盐离子等若长期储存建议使用TE缓冲液溶解TE中的EDTA能螯合Mg2+或Mn 2+离子,抑制DNase pH值为8.0,可防止DNA发生酸解。基因组DNA提取常见问题DNA中含有蛋白，多糖,多酚类杂质DNA在溶解前，有酒精残留

12、，酒精抑制后续酶解 反应DNA中残留有金属离子有RNA的存留原因对策重新纯化DNA过吸附柱去除 蛋白,多糖,多酚等杂质重新沉淀DNA让酒精充分挥发增加70汇醇洗涤的次数（2-3次）加入RNase降解RNA问题一:DNA样品不纯，抑制后续酶解和PCR反应。DNA提取常见问题材料不新鲜 或反复冻融未很好抑制内源核酸酶的活性提取过程操作过于剧烈，DNA被机械打断外源核酸酶污染反复冻融。尽量取新鲜材料,低温保存材料避免反复冻融液氮 研磨或匀浆组织后,应在解冻前加入裂解缓冲液在提取内源核酸酶含量丰富的 材料的DNA时，可增加裂解液中螯合剂的含量，细胞裂解后的后续操作应尽量轻 柔所有试剂用无菌水配制，耗材经

五、dna提取实验各试剂的作用

1、植物植物DNADNA的提取与纯化的提取与纯化 DNA extractionDNA extraction实验一实验一实验原理实验原理植物植物DNADNA的分离是分子生物学、遗传学和育种学等植物科学的分离是分子生物学、遗传学和育种学等植物科学研究的基础要求。对研究的基础要求。对DNADNA提取一般有三个要求：提取一般有三个要求：1、 DNA1、 DNA的纯度可以满足下游操作的要求的纯度可以满足下游操作的要求2、 DNA2、 DNA必须完整必须完整3、 DNA3、 DNA应当有足够的量应当有足够的量构建基因组文库，初始构建基因组文库，初始DNADNA长度必须在长度必须在100kb100kb以上以上,

2、 ,否则酶切否则酶切后两边都带合适末端的有效片段很少。后两边都带合适末端的有效片段很少。RFLPRFLP和和PCRPCR分析，分析，DNADNA长度可短至长度可短至50kb50kb，在该长度以上，在该长度以上，可保证酶切后产生可保证酶切后产生RFLPRFLP片段片段(20kb(20kb以下以下) )，并可保证包含，并可保证包含PCRPCR所扩增的片段所扩增的片段( (一般一般2kb2kb以下以下) )。如果对植物进行大规模筛选，操作程序应当快捷，简便，价如果对植物进行大规模筛选，操作程序应当快捷，简便，价格低廉，并尽可能避免使用有毒试剂。格低廉，并尽可能避免使用有毒试剂。核酸的理化性质核酸的理

3、化性质RNARNA和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶，和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶，DNADNA则为白色类则为白色类似石棉样的纤维状物。除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外，核酸似石棉样的纤维状物。除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外，核酸和核苷酸大都呈酸味。和核苷酸大都呈酸味。 DNADNA、RNARNA和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水，于乙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水，RNARNA钠盐在水中溶解度可达钠盐在水中溶解度可达40g/L40g/L。DNADNA在水中为在水中为10g/L10g/L

4、，呈，呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中，黏性胶体溶液。在酸性溶液中，DNADNA、RNARNA易水解，在中性易水解，在中性或弱碱性溶液中较稳定。或弱碱性溶液中较稳定。 天然状态的天然状态的DNA DNA 是以脱氧核糖核蛋白是以脱氧核糖核蛋白(DNP)(DNP)形式存在于细胞形式存在于细胞核中。要从细胞中提取核中。要从细胞中提取DNADNA时，先把时，先把DNPDNP抽提出来，再把蛋抽提出来，再把蛋白质和糖去除，同时除去白质和糖去除，同时除去RNARNA及无机离子等，从中分离及无机离子等，从中分离DNA DNA 。 核酸的提取方法核酸的提取方法提取植物提取植物DNADNA的方法主要采用的方法主要采用

5、SDSSDS和和CTABCTAB法，对它们进行稍加法，对它们进行稍加修改就可以应用于修改就可以应用于DNADNA的微量提取。两种方法均采用去污剂裂的微量提取。两种方法均采用去污剂裂解细胞并保护解细胞并保护DNADNA不受内源核酸内切酶降解。不受内源核酸内切酶降解。具体方法简单说来就是利用液氮对植物组织进行研磨，从而破具体方法简单说来就是利用液氮对植物组织进行研磨，从而破碎细胞。细胞提取液中含有的碎细胞。细胞提取液中含有的SDSSDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜，溶解膜蛋白而破坏细胞膜，使蛋白质变性而沉淀下来。使蛋白质变性而沉淀下来。EDTAEDTA抑制抑制DNADNA酶的活性。再用酚、酶的活性。再用

6、酚、氯仿抽提的方法去除蛋白，得到的氯仿抽提的方法去除蛋白，得到的DNADNA溶液经乙醇沉淀。溶液经乙醇沉淀。实验材料和试剂实验材料和试剂实验材料：新鲜植物组织。实验材料：新鲜植物组织。100 mmol/L Tris-HCl (pH8.0)50mmol/L EDTA500 mmol/L NaCl1.5% SDSDNA提取缓冲液提取缓冲液实验所需试剂：实验所需试剂：24:1/氯仿氯仿:戊醇戊醇其它试剂：液氮、其它试剂：液氮、TE缓冲液，缓冲液，无水乙醇、无水乙醇、70%乙醇。乙醇。2CTAB buffer 100mM Tris pH8.0 1.4M NaCl 20 mM EDTA pH8.0 2%

7、 CTAB 0.2% 巯基乙醇巯基乙醇酚酚/氯仿（氯仿（1:1） 氯仿：氯仿：50 ml无水乙醇无水乙醇实验仪器实验仪器实验步骤：实验步骤：1、 取新鲜叶片约取新鲜叶片约3g, 剪碎剪碎, 加入液氮充分研磨后转移至加入液氮充分研磨后转移至2ml离心管中；离心管中；2、 在在65预热的提取液中按预热的提取液中按3.8g/L加入加入Na Bisufite, 混匀并调混匀并调pH至至8.0；3、 在管中加入适量提取液，在管中加入适量提取液，60水浴保温约水浴保温约30min，不时颠倒混匀；，不时颠倒混匀； 4、 冷却至温后加入等体积氯仿冷却至温后加入等体积氯仿/异戊醇，用力摇匀后，放置摇床上摇动

8、异戊醇，用力摇匀后，放置摇床上摇动15min左右；左右；5、 温下温下10000rpm离心离心15min，小心吸上清于新的离心管中，加入两倍体，小心吸上清于新的离心管中，加入两倍体积的冷酒精，积的冷酒精，-20 放置放置1h或过夜；或过夜；6、 挑出挑出DNA置于新的管中，挑出有困难时可以低速离心后倒去上清。加入置于新的管中，挑出有困难时可以低速离心后倒去上清。加入适量适量70%酒精，摇动洗涤酒精，摇动洗涤10min，重复洗涤，重复洗涤2-3次；次； 7、 吹干吹干DNA，加入适量，加入适量TE在在65溶解，完全溶解后离心去除杂质；溶解，完全溶解后离心去除杂质； 8、 加入加入RNase（

9、10mg/mL）, 温处理温处理0.5-1h, 除去除去RNA，4或或-20贮存。贮存。 9、 如需纯化如需纯化DNA，再加入适量，再加入适量TE，氯仿，氯仿/异戊醇多次抽提后吸取上清，加异戊醇多次抽提后吸取上清，加入入3ml/L NaAc和两倍体积的乙醇，和两倍体积的乙醇， -20 放置放置1h或过夜；或过夜；10、吹干沉淀后，加入适量吹干沉淀后，加入适量TE， 65溶解，溶解， 4或或-20贮存。贮存。 1、 1、 植物叶子约植物叶子约3 3g, g, 剪碎置剪碎置预冷预冷研钵中研钵中 加入液氮充分研磨，注意加入液氮充分研磨，注意不能干磨不能干磨混合球磨仪混合球磨仪3、 603、 60水浴保温水浴保温30-6030-60minmin加入等体积氯仿，用力摇匀加入等体积氯仿，用力摇匀6、 6、 再次再次10000rpm10000rpm离心离心5 5minmin； 将上清小心吸入新的离心管中；将上清小心吸入新的离心管中； DNADNA样品在样品在1% Agarose1% Agarose胶上电泳（例图）胶上电泳（例图） 实验注意事项实验注意事项1、 1、微量移液枪的使用一定要规范，吸取氯仿等有机微量移液枪的使用一定要规范，吸取氯仿等有机试剂要注意不要将试剂吸入枪中；试剂要注意不要将试剂吸入枪中；2、 2、提取过程中的机械力可能使大分子

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